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作育基
产品说明
食管癌完全作育基是一种为增进食管癌原代细胞体外生长而设计的作育基。。。它是一种无菌的液体混淆系统，，，，，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质。。。作育基基于碳酸氢盐的缓冲系统，，，，，在5% CO2/95%空气的作育箱中平衡时，，，，，pH值为7.4。。。该作育基的配方可以提供一个合适的平衡的营养情形，，，，，选择性地增进体外人食管鳞癌原代细胞的生长。。。
使用说明
4℃避光生涯2个月内有用。。。
1.食管癌原代细胞作育
至少提前半小时使用稀释后的Matrigel基质胶预铺作育瓶/板，，，，，使用前吸干基质胶，，，，，用稀释液润洗一遍。。。将疏散并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数目接种于作育瓶/板，，，，，补加完全作育基至所需体积，，，，，轻轻摇晃混匀，，，，，外貌消毒后置作育箱，，，，，37 ℃ 、5 % CO2条件作育;原代细胞首次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁)，，，，，第一次换液建议换半液。。。
2.食管癌原代细胞传代
镜下视察细胞形成克隆，，，，，且汇合度80~90%时即可传代；；；；；；作育箱中取出细胞，，，，，弃旧作育液，，，，，加入适量0.05%胰酶，，，，，37℃孵育，，，，，5 min后拿出轻拍作育瓶/板侧面，，，，，显微镜下视察细胞消化情形；；；；；；细胞消化至细胞变圆并最先脱落时用终止作育基终止消化，，，，，并将细胞转移至离心管中，，，，，1500 rpm离心3 min；；；；；；弃上清，，，，，以1-2 mL完全作育基重悬细胞，，，，，活细胞计数，，，，，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于作育瓶/板，，，，，补加完全作育基至所需体积，，，，，轻轻摇晃混匀，，，，，外貌消毒后置作育箱，，，，，37 ℃ 、5 % CO2条件作育。。。其他办法同上。。。
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